臭氧消毒柜的消毒滅菌試驗

臭氧消毒柜滅菌試驗

一、背景

臭氧能迅速彌漫，無滅菌死角，優于傳統的滅菌消毒方法，并能很快自行分解為氧氣或單 個氧原子，無有毒殘留物。臭氧已廣泛用于水處理、空氣凈化、食品加工、醫療、醫藥、水產養殖等領域。臭氧是一種強氧化劑，滅菌過程有以下 3 種形式：1.臭氧能氧化分解細菌內部葡萄糖所需的酶，使細菌滅活死亡。2.直接與細菌、病毒作用，破壞它們的細胞器和 DNA、RNA，使細菌的新陳代謝受到破壞，導致細菌死亡。3.透過細胞膜組織，侵入細胞內，作用于外膜的脂蛋白和內部的脂多糖，使細菌發生通透性畸變而溶解死亡。本實驗以三種常見高濃度細菌，分別置于高臭氧濃度進行全部殺滅效果觀察，以確定兩種模式：1、7000ppm濃度臭氧殺菌效果；2、7000ppm濃度臭氧+酒精消毒組合方式殺菌效果。

二、 實驗目的：

1、 臭氧具有非常廣譜的殺菌效果，本實驗以設定高濃度條件下臭氧濃度對三種常用標準菌：大腸桿菌、 枯草芽孢桿菌、白色念珠菌進行殺滅實驗，驗證當臭氧濃度大于7000ppm 時能否絕對殺滅上述三種高濃度的微生物。

2、 臭氧和酒精消毒殺滅菌種譜系不同，本實驗采用臭氧濃度大于7000ppm消毒1小時后，再噴灑酒精方式消毒，驗證此方案能否絕對殺滅上述三種高濃度的微生物。

3、 通過本試驗驗證南京康善制藥設備有限公司生產臭氧消毒柜能否達到滅菌效果。

三、試驗方案：

1、 領取生產用透析桶藍色瓶蓋9000個，紅色瓶蓋36個。

2、 檢測方法：

⑴ 菌種準備：標準菌株大腸桿菌 C3000 擴大培養稀釋至濃度 8*108/ml、枯草芽孢桿菌 6350擴大培養稀釋至濃度：20*108/ml、白色念珠菌 98001 擴大培養稀釋至濃度 4.5*106/ml。

⑵ 菌種接種：用棉簽蘸取每種細菌液涂布于紅色瓶蓋內墊表面，每種蓋涂布3個共9個瓶蓋；剩余3紅色瓶蓋不涂布任何細菌液，留做對照樣品。

⑶ 培養皿準備：市售營養瓊脂培養基及玫瑰紅培養基，按照使用說明，無菌條件下制備平皿，每皿 12-15ml。

⑷ 兩次式樣：將12個瓶蓋置于物料轉筒中，分別采取兩種滅菌方式進行滅菌①臭氧濃度達到濃度后，持續消毒1h；②在規定濃度臭氧下消毒1h,再用75%酒精噴淋10min消毒。

⑸ 樣品取樣：用消毒后物料鉗挑出紅色瓶蓋，用棉簽簽蘸取表面用于培養基上。用浸有無菌生理鹽水的采樣棉拭子，橫、豎往返各涂擦桶蓋內側面5次，并隨之轉動棉拭子，剪去采樣人手觸及的部分，將棉拭子放人裝有10ml采樣液的試管中送檢。取樣應在潔凈取樣車中進行。

⑹ 細菌培養C3000 和 63501的細菌液，用棉簽蘸起均勻涂布接種于營養瓊脂培養基上，98001 涂布于玫瑰紅鈉瓊脂培養基上。98001 放置于 22-25℃培養 72 小時；C3000 及 63501 放置于 35℃培養 48 小時進行結果判定。

（7）結果觀察 經過培養 35℃和 22-25℃培養 48 小時后對上述滅菌培養基進行菌落生長情況觀察，以確定不同臭氧濃度的滅菌效果，結果如下： 1、非滅菌培養基對照成立。 2、各臭氧濃度滅菌效果見下列表格，其中“+”為細菌培養陽性、“-”為細菌培養陰性。記錄于以下表格一、表格二中。

 表格一 ：臭氧滅菌結果

        表格二：臭氧滅菌+酒精消毒滅菌結果